آزمایش احیای متیلن بلو :

  

  یكی از آزمایش های تعیین كیفیت شیر كه با آن تعداد باكتری های موجود در شیر خام تخمین زده می شود ، آزمایش احیای متیلن بلو است .

 

   اساس  آزمایش:

 اساس این آزمایش مبتنی بر این است كه باكتری های موجود در شیر در دمای مناسب به سرعت رشد كرده و اكسیژن محیط را مصرف كنند  در اثر مصرف اكسیژن ، حالت شیمیایی محیط تغییر كرده و پتانسیل اكسیداسیون و احیاء پایین می آید . برای تخمین زدن میزان فعالیت باكتری ها ، متیلن بلو ( شناساگر حالت اكسیداسیون و احیا ء ) به شیر افزوده می شود . این شناساگر در ابتدا رنگ آبی دارد . اما پس از مصرف شدن اكسیژن محیط توسط باكتری های موجود در شیر رنگ خود را از دست داده و بی رنگ می شود .

   

به طور كلی ، طول مدت احیاء با تعداد باكتری های موجود در شیر نسبت عكس دارد . یعنی هر چه تعداد باكتری ها زیاد تر باشد زمان كمتری برای تغییر رنگ متیلن بلو لازم است . برای تسریع رشد باكتری های موجود در شیر و كاهش طول مدت آزمایش ، پس از افزودن شناساگر ، باید نمونه شیر را در دمای كنترل شده قرار داد .

مواد شیمیایی:

    قرص های تیوسیانا ت متیلن بلو : قرص های استاندارد كه هریك حاوی 8/8 میلی گرم رنگ متیلن بلواست .

طرز تهیه محلول رنگ:

    در یك ارلن مایر 200 میلی لیتر آب مقطر جوشا نده و با یك انبرك استیل ،یك قرص متیلن بلو را درآن حل كنید. قبل از سرد شدن آب،قرص باید كاملأ حل سده باشد.میزان مصرف این محلول  1/0مقدار نمونه (بر حسب میلی لیتر) است. این محلول باید در ظرف شیشه ای تیره رنگ و جای خنك نگهداری شود.

 

روش آزمایش:

1- 10میلی لیتر از شیر خام مورد آزمایش را دریك لوله آزمایش استیریل در داربریزید.

2- یك میلی لیتر محلول تیوسیانات متیلن بلو را به خوبی با آن مخلوط كنید.

3-به عنوان محلول كنترول ،درلوله ازمایش دیگری 10میلی لیتر شیر استیریل ریخته و یك میلی لیتر محلول متیلن بلو را به خوبی با ان مخلوط كنید

4-لوله ها را در حمام آب 35-37 درجه سانتیگراد قرار داده و هر 5 دقیقه یك بار، آن ها رااز نظر تغییر رنگ كنترل كنید . اگر پس از نیم ساعت ،هیچ تغییر رنگی صورت نگرفت،هر یك ساعت یك بار آن ها را كنترل كنید.

 

نتبجه آزمایش:

   مدت زمان برای بی رنگ شدن متیلن بلو به عنوان احیای شیر در نظر گرفته می شود. هر چقدر این مدت طولانی تر باشد ،شیر مورد آزمایش از كیفیت بهتری برخور دار است.

    جدول زیر درجه بندی كیفی شیر را نشان می دهد:

 

درجه بندی شیر

زمان لازم برای بی رنگ شدن متیلن بلو

تعداد تقریبی باكتری ها

در یك میلی لیتر شیر

خوب

بیش از 8 ساعت

كمتر از 500000

نسبتأ خوب

6-8 ساعت

1000000-4000000

قابل قبول

2-6 ساعت

4000000-20000000

بد

كمتر از 2 ساعت

بیش از 20000000